细胞培养的具体步骤
一、复苏 1.把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。
液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍。
细胞培养(换液/传代/冻存/复苏)操作说明
(1)悬浮细胞:收集培养容器中的所有细胞悬液。
250 g离心4 min后弃去上清。
使用预热的完全培养基重悬,将细胞悬液接种到合适的培养容器中。
(2)贴壁细胞:直接弃去培养容器中的上清,添加预热的完全培养基。
传代细胞的培养步骤
(1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。
(2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
3、融合瘤(hybridoma)有些hybridomacell需培养三天以上才会。
细胞培养基本方法(复苏、换液、传代、冻存)
细胞培养1一原代培养(略)2二.传代培养准备及注意事项换液传代冻存复苏MTT3准备事项1.紫外灯照射细胞室30分钟,风机运行10分钟后方可进入实验室.2.穿专用的口罩,帽子,拖鞋,工作衣等.3.带手套,并用酒精擦拭之.4.准备好。